DIAGNÓSTICO MOLECULAR DA ESPOROTRICOSE NASAL FELINA RECORRENTE

INTRODUÇÃO: A esporotricose é uma dermatozoonose causada por fungos do gênero Sporothrix spp. Sua transmissão ocorre principalmente através da inoculação traumática do organismo na derme, sendo os felinos um importante fator zoonótico devido a alta carga fúngica presente nas lesões e mucosas. O diagnóstico dessa dermatopatia é realizado através da cultura fúngica, método considerado padrão ouro, entretanto, essa técnica necessita de infraestrutura local para a realização, além da espera de até 30 dias para a obtenção do resultado, impedindo o tratamento precoce. Devido a isso, o objetivo desse projeto foi avaliar a eficácia diagnóstica do método molecular loop-mediated isothermal amplification (LAMP) como possível método diagnóstico em quadros respiratórios de felinos com esporotricose recidivante. OBJETIVOS: Avaliação da eficácia diagnóstica da técnica molecular de amplificação isotérmica de DNA, loop mediated isothermal amplification (LAMP), através de swab intranasal em felinos com esporotricose recorrente. MATERIAIS E MÉTODO: Para tanto, foram coletadas amostras de swab intranasal de felinos domésticos com quadro recidivante da esporotricose. O DNA das amostras foi extraído através do kit PureLink (Invitrogen, Thermo Scientific) seguindo o protocolo de extração do fabricante. Em seguida, o material genético foi submetido a amplificação genética por LAMP a 65 °C por 25 minutos, utilizando kit colorimétrico Warmstart Colorimetric Lamp 2x Master M (New England Biolabs Inc) para um alvo ribossomal bem conservado entre o gênero Sporothrix spp. O resultado foi confirmado por mudança de cor, seguindo recomendação do fabricante e eletroforese em gel de agarose (2%) e a sensibilidade do método de coleta foi avaliado. RESULTADOS: Os resultados indicaram que foi possível identificar o Sporothrix spp. nas amostras intranasais coletadas, apresentando uma sensibilidade de 70%. CONSIDERAÇÕES FINAIS: O método molecular LAMP através de amostras intranasais de felinos com esporotricose recidivante demostraram viabilidade dessa técnica em quadros respiratórios, podendo ser uma alternativa rápida e acessível para tutores de felinos com suspeita de esporotricose.

PALAVRAS-CHAVE: Esporotricose; recidiva; molecular; LAMP.