DESIGN E PADRONIZAÇÃO DO PRIMER PARA VARIANTE RS2285666 DO GENE ACE2 DO SARS-COV-2

INTRODUÇÃO: O SARS-CoV-2 é o vírus responsável pela síndrome respiratória grave que causou a pandemia em 2020. Tal vírus possui a proteína Spike, composta por duas subunidades, S1 e S2, das quais S1 é responsável pela interação do vírus com a superfície celular e S2 promove o envelope do vírus com a membrana plasmídica da célula. Quando o domínio RBD de S1 interage com os receptores ECA2, ocorre infecção viral. ECA2 é um gene polimórfico com cerca de 140 polimorfismos de pequenos nucleotídeos, alguns dos quais foram estudados para envolvimento direto com a infecção por SARS-CoV-2. Variantes do ECA2 alteram a afinidade do receptor, aumentando sua interação com o vírus. Isto diminui a expressão de ECA2 devido à regulação da tradução, levando a um desequilíbrio em ECA1/ECA2. Uma deficiência baixa ou moderada de ECA2 pode levar a uma falha no mecanismo de defesa do organismo. Uma vez que ass gestantes são mais suscetíveis a patógenos respiratórios e pneumonias graves devido a alterações imunológicas e fisiológicas durante a gravidez. OBJETIVOS: Analisar o comportamento viral em gestantes infectadas e não infectadas pelo SARS-CoV-2 e elucidar o papel da variante rs2285666 do gene ECA2 com relação ao andamento clínico das gestantes. MATERIAIS E MÉTODO: Inicialmente, foi feita a busca e a identificação da sequência completa do gene ECA2, por meio de buscas em bases de dados genéticos, utilizando a página eletrônica do NCBI, através de técnicas de bioinformática. Dentro da sequência completa do gene ECA2, verificamos a presença da variante rs2285666. Essa sequência é o DNA molde, o código genético que vai nos servir de base para o desenho do primer. Para o desenho de primers foi utilizado o primer-BLAST e o BLASTn, por meio dos quais as diferentes sequências foram alinhadas e comparadas, sendo possível reconhecer a região de maior similaridade, que então foi utilizada para o desenho do primer. Assim que o primer foi desenhado, foi preciso a identificação da enzima de restrição para o método de RFLP, por técnica de bioinformática RESULTADOS: Realizamos o design de primer e identificação de uma enzima de restrição para utilizar a técnica QRT-PCR em conjunto com a RFLP para análise em eletroforese em gel de agarose. CONSIDERAÇÕES FINAIS: A pandemia do COVID-19 foi um período de extremo estresse para a população, cuja doença viral responsável ainda está sendo estudada. Uma população de risco são as gestantes, cujos efeitos da doença ainda estão sendo estudados. Nesse sentido, a pesquisa em questão abre caminhos para estudos futuros sobre as variantes do gene ECA2, via de entrada da carga viral nas células hospedeiras, e respectivas responsabilidades e influências no andamento clínico da doença, abrindo caminho para profilaxias e tratamentos mais eficazes

PALAVRAS-CHAVE: 1. rs2285666; 2. primer design; 3. SARS-Cov-2; 4. gestantes; 5 QRT-PCR.