AVALIAÇÃO DO DIAGNÓSTICO MOLECULAR DA ESPOROTRICOSE FELINA A PARTIR DO EXSUDATO LESIONAL E SECREÇÕES RESPIRATÓRIAS

INTRODUÇÃO: A esporotricose é uma zoonose causada por fungos do gênero Sporothrix spp. Sua transmissão ocorre principalmente pela inoculação traumática do organismo da derme, sendo os felinos machos com acesso a rua um importante fator zoonótico, visto que a principal forma de contágio é via gato-humano através de mordidas e arranhaduras de animais contaminados. O diagnóstico dessa dermatopatia é realizado principalmente através da cultura fúngica, método considerado padrão ouro. Entretanto essa técnica diagnóstica necessita infraestrutura e profissionais capacitados, além da demora de uma semana para a obtenção do resultado, diminuindo o acesso ao diagnóstico e terapia medicamentosa da esporotricose e colaborando para a piora clínica do animal. Nesse contexto, o objetivo deste projeto de pesquisa foi investigar a aplicabilidade de métodos de coleta não invasivos para o diagnóstico da esporotricose felina. OBJETIVOS: Diagnosticar a esporotricose felina pela amplificação isotérmica de DNA, loop-mediated isothermal amplification (LAMP), por meio de métodos de coleta não invasivos. MATERIAIS E MÉTODO: Para tanto, foram coletadas amostras de swab lesional e intranasal e pelo método tape stripping de felinos domésticos diagnosticados com esporotricose. O DNA das amostras foi extraído e qualificadas e quantificadas por espectrofotometria. Em seguida, o material genético foi submetido a amplificação genética por LAMP a 65 °C por 25 minutos, utilizando kit colorimétrico Warmstart Colorimetric Lamp 2x Master M (New England Biolabs Inc) para um alvo ribossomal bem conservado entre o gênero Sporothrix spp. O resultado foi confirmado por mudança de cor, seguindo recomendação do fabricante e eletroforese em gel de agarose (2%) e a sensibilidade e especificidade dos métodos de coleta foram avaliados. RESULTADOS: Os resultados preliminares indicaram que foi possível identificar o Sporothrix spp. em ambas as amostras de swab lesional e intranasal e pelo método tape stripping. Dentre os três métodos, o tape stripping apresentou menor coleta de carga genética que os demais, podendo ser uma limitação da técnica de estudo. Por fim foram observadas sensibilidade e especificidade, respectivamente de 94% e 100% para amostras de swab lesional (n=15); 82% e 95% para amostras do swab intranasal (n=10); e 100% e 95% para as coletadas pelo método tape stripping (n=11). CONSIDERAÇÕES FINAIS: A utilização do método molecular LAMP através dessas técnicas de coleta não invasivas apresentou resultados preliminares promissores, demostrando ser uma alternativa viável, rápida e acessível para os tutores de felinos com suspeita de esporotricose.

PALAVRAS-CHAVE: Esporotricose; diagnóstico; LAMP