CARACTERIZAÇÃO DA FRAGILIDADE OSMÓTICA EM ERITRÓCITOS INDUZIDA POR AÇÃO DOS AGONISTAS YODA1 E JEDI1 VIA MECANORRECEPTOR PIEZO1

INTRODUÇÃO: O canal iônico mecanossensível Piezo1 é ativado sinteticamente pelas moléculas agonistas Yoda1 e Jedi1. A ativação de Piezo1 em eritrócitos promove a entrada de cálcio para o meio intracelular, relacionado com aumento de fragilidade osmótica nestas células. Nenhum estudo comparou o efeito destes dois agonistas em eritrócitos maduros de seres humanos saudáveis. OBJETIVOS: Caracterizar a fragilidade osmótica em RBC induzida por Yoda1 e Jedi1 via mecanorreceptor Piezo1. MATERIAIS E MÉTODO: Eritrócitos isolados foram tratados por 30 minutos com 8, 17 e 87 μM de Yoda1 e Jedi1 ou 0,12 % de DMSO, diluídos em solução salina tamponada contendo 4% de albumina. 10 μL das suspensões de células foram submetidos a concentrações crescentes de soluções salinas. O sobrenadante das células foi adquirido por centrifugação e a densidade óptica foi lida a 540 nanômetros (nm). Os dados foram ajustados a uma regressão logística de 4 parâmetros e a concentração salina onde 50% de hemólise ocorreu foi atribuída como índice de fragilidade osmótica (IFO). A distribuição foi avaliada e a diferença entre as médias de IFO entre cada tratamento foi testada pelo teste de ANOVA a um fator com medidas repetidas. Valores de p inferiores a 0,05 foram considerados significativos. RESULTADOS: Não foi observada perda de viabilidade celular decorrente de nenhum tratamento proposto. Observou-se um aumento no IFO para todos os tratamentos de Yoda1 (8 mM: 4,85 ± 0,34; 17 mM: 4,82 ± 0,39; 87 mM: 4,74 ± 0,30) em contraste com o controle de DMSO (4,53 ± 0,18), porém, tal aumento não foi considerado significativo (p=0,13; p=0,26; p=0,09, respectivamente. O padrão de IFO foi obtido em todas as concentrações de Jedi1 (8 mM: 4,61 ± 0,37; 17 mM: 4,65 ± 0,49; 87 mM: 4,75 ± 0,52) sem significância estatística (p=0,86; p=0,88 e p=0,61, respectivamente). CONSIDERAÇÕES FINAIS: Yoda1 e Jedi1 não aumentaram a fragilidade osmótica de eritrócitos via Piezo1 de forma significativa.

PALAVRAS-CHAVE: Fragilidade osmótica; Mecanorreceptor; Piezo1; Yoda1; Jedi1.