EFEITOS DA SUPLEMENTAÇÃO COM ÁCIDO ASCÓRBICO NO CULTIVO IN VITRO DE TECIDOS OVARIANOS

INTRODUÇÃO: O cultivo in vitro de tecido ovariano constitui uma alternativa para o aproveitamento de folículos pré-antrais, porém as condições artificiais do sistema podem favorecer o estresse oxidativo e comprometer a integridade folicular. Nesse contexto, o ácido ascórbico apresenta potencial como suplemento antioxidante do meio de cultivo. OBJETIVOS: O objetivo deste trabalho foi avaliar os efeitos de diferentes concentrações de ácido ascórbico sobre a integridade morfológica e o desenvolvimento de folículos presentes em fragmentos de tecido ovariano bovino cultivados in vitro durante seis e 14 dias. MATERIAIS E MÉTODO: Foram utilizados seis ovários provenientes de três fêmeas bovinas púberes da espécie Bos taurus taurus. Os fragmentos ovarianos foram distribuídos em um grupo controle basal não cultivado e em tratamentos suplementados com 50 ou 100 µg/mL de ácido ascórbico, mantidos em cultivo por seis ou 14 dias. Posteriormente, os tecidos foram submetidos ao processamento histológico e à coloração por hematoxilina e eosina. Foram avaliados 450 folículos, classificados quanto ao estágio de desenvolvimento e à integridade morfológica. As comparações entre as condições experimentais foram realizadas pelo teste de Cochran–Mantel–Haenszel, considerando os animais como estratos, com ajuste dos valores de p pelo método de Holm. RESULTADOS: Aos seis dias, a concentração de 100 µg/mL apresentou maior proporção de folículos morfologicamente íntegros (42,22%) em comparação à concentração de 50 µg/mL (13,33%), com diferença estatisticamente significativa após o ajuste para comparações múltiplas (p < 0,001). Aos 14 dias, não foi observada diferença significativa na integridade morfológica entre as concentrações. Em relação ao desenvolvimento folicular, não houve diferença significativa entre as concentrações aos seis dias, enquanto aos 14 dias o grupo suplementado com 100 µg/mL apresentou 100% dos folículos em desenvolvimento, proporção significativamente superior à observada no grupo com 50 µg/mL (83,33%; p < 0,001). Entretanto, o maior desenvolvimento observado aos 14 dias não foi acompanhado por maior preservação morfológica. CONSIDERAÇÕES FINAIS: Dessa forma, os resultados obtidos variaram de acordo com a concentração de ácido ascórbico, o período de cultivo e o parâmetro avaliado. A concentração de 100 µg/mL apresentou resultados favoráveis em parâmetros específicos, porém o reduzido número de unidades biológicas avaliadas reforça a necessidade de novos estudos com maior número de animais para confirmação dos achados.

PALAVRAS-CHAVE: Vitamina C; Folículos ovarianos, Integridade morfológica.