COMPARAÇÃO DO DESEMPENHO DE MÉTODO DE EXTRAÇÃO DE DNA A PARTIR DE SALIVA E SANGUE VENOSO.

INTRODUÇÃO: A hanseníase é uma doença infecciosa crônica causada pelo bacilo Mycobacterium leprae, que afeta principalmente os macrófagos cutâneos e as células de Schwann do sistema nervoso periférico. Pesquisas recentes indicam uma forte relação entre a genética do hospedeiro e a suscetibilidade à doença. Com o objetivo de investigar essa relação, o grupo de pesquisa proponente instituiu um biorrepositório de amostras genotipadas para os marcadores de interesse. Entretanto, observa-se relutância por parte dos voluntários em fornecer amostras sanguíneas devido ao desconforto causado pela punção venosa. Nesse contexto, surge a necessidade de investigar e validar uma fonte biológica alternativa para a extração de DNA, visando uma coleta menos invasiva que favoreça a adesão dos participantes, mantendo a qualidade necessária para análises genômicas. OBJETIVOS: Avaliar e comparar o desempenho de um método de extração de DNA a partir de saliva em relação aos resultados obtidos a partir de sangue, visando a uma alternativa menos invasiva para a obtenção de amostras. MATERIAIS E MÉTODO: As amostras de saliva dos doadores foram coletadas por bochecho com solução de glicose a 3%, enquanto as amostras de sangue foram obtidas dos mesmos voluntários por punção venosa. Posteriormente, as amostras foram submetidas à extração de DNA genômico pelo método de salting-out, adaptado às particularidades de cada matriz biológica. A quantificação e a análise de pureza foram realizadas por espectrofotometria (NanoDrop™), seguidas de genotipagem da variante (rs6930532) do gene PRKN por discriminação alélica baseada em fluorescência para validação técnica. RESULTADOS: Os resultados demonstraram que, embora o rendimento total de DNA a partir da saliva possa apresentar variações individuais, a qualidade e a integridade do material obtido foram suficientes para a genotipagem bem-sucedida, com concordância com os resultados previamente obtidos a partir de sangue. CONSIDERAÇÕES FINAIS: Conclui-se que a saliva constitui uma matriz biológica fidedigna, viável e menos invasiva, adequada à expansão do biorrepositório em estudos genômicos de larga escala, garantindo a continuidade das investigações sobre a suscetibilidade à hanseníase.

PALAVRAS-CHAVE: Extração de DNA; Saliva; Sangue; Genotipagem; Hanseníase; Biorrepositório.