EXPANSÃO DO BIORREPOSITÓRIO DE DNA PARA ANÁLISE DE VARIANTES GENÉTICAS ASSOCIADAS À HANSENÍASE.

INTRODUÇÃO: A hanseníase é uma doença infecciosa crônica de base complexa e multifatorial, na qual a genética do hospedeiro atua de forma central na definição da suscetibilidade e na modulação do desenvolvimento de endofenótipos, como o início precoce da doença. Previamente, variantes nos genes LRRK2 (N551K, R1398H) e NOD2 (R702W) foram identificadas em uma família com forte histórico de agregação familiar da doença e casos de início precoce extremo, e foram escolhidas como fortes candidatas à modulação desse risco, hipótese a ser investigada em estudos funcionais envolvendo células de doadores que contêm as variantes de interesse. Neste contexto, a consolidação de um biorrepositório populacional surge como uma estratégia viável para identificar portadores desses perfis genotípicos, potenciais doadores de células para ensaios funcionais. OBJETIVOS: Expandir o biorrepositório de DNA do grupo de pesquisa por meio do recrutamento e da genotipagem de voluntários em Curitiba, visando caracterizar a amostra populacional e identificar portadores dos genótipos de interesse biológico mapeados na família índice. MATERIAIS E MÉTODO: O projeto, aprovado pelo comitê de ética da PUCPR, vem recrutando voluntários no campus da universidade. Realizou-se a coleta de sangue periférico seguida da extração de DNA genômico pelo método adaptado de salting-out. A concentração e a pureza do material foram avaliadas por espectrofotometria no equipamento NanoDrop 2000. A genotipagem das três variantes de interesse foi realizada com sucesso por meio da técnica de discriminação alélica baseada em fluorescência (sondas TaqMan) na plataforma QuantStudio 7 Flex. RESULTADOS: O biorrepositório alcançou um total acumulado de 604 indivíduos, dos quais 160 foram integrados neste trabalho. As frequências das variantes de LRRK2 na amostra de 160 indivíduos adicionada ao biorrepositório (N551K: 13,36% e R1398H: 13,01%) mostraram-se alinhadas às observadas nas populações de referência. Contudo, a variante R702W de NOD2 apresentou frequência de 9,25% na mesma amostra de 160 novos indivíduos, superior à observada em bancos de dados globais. Foram localizados 3 indivíduos portadores estritos dos genótipos-alvo nesta etapa. CONSIDERAÇÕES FINAIS: A identificação bem-sucedida de portadores valida a metodologia de recrutamento populacional. Os resultados confirmam que, embora as variantes de risco apresentem baixa frequência na população local de Curitiba, a manutenção e expansão do biorrepositório são indispensáveis para fornecer material biológico de interesse para futuros estudos funcionais voltados ao entendimento da hanseníase.

PALAVRAS-CHAVE: Hanseníase; Biorrepositório; Polimorfismos.