ANÁLISE DA EXPRESSÃO DE MARCADORES NEURONAIS EM CÉLULAS-TRONCO DERIVADAS DA PAPILA APICAL EM TERAPIAS REGENERATIVAS

INTRODUÇÃO: As células-tronco mesenquimais (CTM) se destacam por sua capacidade de autorrenovação e diferenciação em linhagens celulares. As CTM da papila apical (SCAP), proveniente dos tecidos dentários, são de fácil obtenção e apresentam maior rendimento celular em comparação às CTM da medula óssea. Por compartilharem a mesma origem embrionária dos neurônios, a ectoderme, as SCAP, apresentam um grande potencial para a diferenciação neuronal. O estudo sugere que as SCAP expressam marcadores neuronais antes mesmo da diferenciação, sendo candidatas promissoras para o tratamento de doenças neurodegenerativas. OBJETIVOS: Avaliar a expressão de marcadores neuronais nas células-tronco isoladas da papila apical. MATERIAIS E MÉTODO: Este estudo foi realizado no Laboratório Experimental de Cultivo Celular (LECC) da Pontifícia Universidade Católica do Paraná (PUCPR), com aprovação do Comitê de Ética em Pesquisa da PUCPR (CAAE: 67807123.8.0000.0020). Foram coletados dentes permanentes de pacientes com idade de 16 e 17 anos, extraídos por razões ortodônticas. Após o isolamento, as SCAP foram cultivadas até alcançarem a terceira passagem. Seguindo os critérios estabelecidos pela Sociedade Internacional de Terapia Celular e Gênica (ISCT), foi realizada a caracterização das CTM por citometria de fluxo. Utilizando a mesma técnica, foram analisados os marcadores neuronais CD24, CD56, CD146 e CD271. Além disso, foram realizadas as análises de proliferação, e senescência, também por citometria de fluxo, para analisar a atividade celular. Para observar a expressão dos marcadores neuronais Nestina e β-tubulina III na SCAP, foi utilizada a técnica de imunofluorescência. RESULTADOS: As SCAP exibiram morfologia fibroblastóide e adesão ao plástico, características de CTM. A análise por citometria de fluxo revelou expressão positiva (>95%) para CD29, CD73, CD90 e CD105, e negativa (<2%) para CD14, CD19, CD34, CD45 e HLA-DR, conforme os critérios da ISCT. Referente aos marcadores neuronais, 63% das células expressaram CD56 e 41% expressaram CD146, enquanto CD24 e CD271 apresentaram baixa expressão (5% e 2%, respectivamente) antes da indução da linhagem neuronal. A análise por imunofluorescência confirmou a presença de Nestina, um marcador de células progenitoras neuronais, e β-tubulina III, marcador de neurônios imaturos. Após 24 horas, 79,7% das células estavam em proliferação, com apenas 5% exibindo características de células senescentes. CONSIDERAÇÕES FINAIS: O estudo confirmou que as SCAP têm características típicas de CTM e demonstram um potencial significativo para linhagem neuronal, expressando marcadores deste tipo celular antes da indução a diferenciação. Com uma alta taxa de proliferação e baixa senescência, as SCAP se mostram promissoras para terapias regenerativas, especialmente no tratamento de doenças neurodegenerativas.

PALAVRAS-CHAVE: Células-tronco mesenquimais; Tecidos dentários; Ectoderme; Proliferação; Senescência