INTRODUÇÃO: Anomalias nos cromossomos 13,18 e 21 são as mais relevantes no que se refere às más-formações fetais, sendo a trissomia do 13 conhecida por síndrome de Patau, a trissomia do 18 por síndrome de Edwards e a trissomia do cromossomo 21, a mais frequente, conhecida por síndrome de Down. Para a detecção de mosaicismos, o método de hibridização in situ por fluorescência (FISH) é o mais utilizado, principalmente por permitir detectar e analisar diferentes anomalias de uma só vez. Com o aumento da utilização do método de FISH, novas sondas vêm sendo utilizadas para detecção de mosaicismos, e por isso, a validação destas sondas é requirida por agências internacionais, que atuam na proteção de saúde pública, na liberação de medicamentos e de produtos biológicos. A validação consiste em diversos testes que visam analisar a sensibilidade, acurácia e especificidade da sonda em relação ao cromossomo alvo em que ela se hibridizará. – OBJETIVOS: Validar a sonda pré-natal de DNA para detectar e quantificar os cromossomos 13, 18 e 21 para futuro uso no controle de qualidade de células-tronco mesenquimais de tecido de cordão umbilical, cultivadas e expandidas para terapia celular. – MATERIAIS E MÉTODO: Foi realizado FISH interfásico em 5 amostras provenientes de sangue de cordão umbilical (SCU) e 6 amostras de células-tronco mesenquimais (CTM) derivadas de tecido de cordão umbilical. As lâminas foram analisadas em microscópio de fluorescência e o padrão de sinal de 200 núcleos/metáfases de cada amostra foram anotados. Para cada padrão de sinal foi calculado a função Beta inverso do Excel, utilizado para estabelecer o valor de corte (cutoff) de cada padrão. – RESULTADOS: Os padrões de sinais encontrados tantos das amostras de sangue de cordão umbilical quanto de célula-tronco mesenquimal foram listados e comparados. Foram encontrados 13 diferentes padrões para as amostras de SCU e 32 diferentes padrões para as amostras de CTM. A partir dos valores encontrados do Beta inverso, foi estabelecido o valor de corte (cutoff) para cada padrão obtido. A sensibilidade e a especificidade da sonda foram calculadas a partir dos padrões encontrados para as amostras de SCU e CTM, e ambas se mostraram satisfatórias. – CONSIDERAÇÕES FINAIS: As amostras do sangue de cordão umbilical foram mais adequadas para a validação da sonda pré-natal, por terem apresentado melhores valores de especificidade e sensibilidade e uma quantidade menor na variação de padrões diferentes do esperado.
