INTRODUÇÃO: A esporotricose é uma infecção micótica granulomatosa causada por fungos do complexo Sporothrix spp. No Brasil, seu principal agente é o Sporothrix brasiliensis, o qual é transmitida principalmente por mordidas e arranhaduras de felinos contaminados. O diagnóstico é realizado principalmente pela cultura fúngica, o que atrasa o início do tratamento, contribuindo para a evolução e piora do quadro clínico do animal. Alternativo aos métodos convencionas, a técnica de detecção molecular loop-mediated isothermal amplification (LAMP) vem demonstrando-se acessível economicamente e aplicável a realidade social de doenças negligenciadas. – OBJETIVOS: Avaliar a sensibilidade e especificidade da amplificação isotérmica de DNA, LAMP para o diagnóstico ambulatorial da esporotricose em felinos. – MATERIAIS E MÉTODO: O Sporohrix brasiliensis foi isolado de amostras de swab do exsudato por meio do cultivo microbiológico de gatos com diagnóstico de esporotricose atendidos na Clínica Veterinária Escola- PUCPR. O DNA obtido a partir em amostras de cultura em ponto único foi quantificado por qPCR. Em seguida, o material genético foi testado para amplificação isotermal por LAMP a 65 °C. O resultado foi analisado pela mudança de coloração das amostras de rosa avermelhado, quando negativas, para amarelo, quando positivas. Por fim, a confirmação do amplicon característico de LAMP foi feito pela eletroforese em gel. – RESULTADOS: De 31 amostras de isolados, 22 foram processadas, sendo 21 positivas (95,45%) e apenas 1 resultou em falso-negativo. Todas as amostras obtidas foram também analisadas pelo técnica de qPCR, utilizando os mesmos primers externos do LAMP, levando em consideração o limite de detecção da técnica isotermal, e apresentaram material genético suficiente para serem identificadas pelo LAMP. – CONSIDERAÇÕES FINAIS: Os resultados sugerem um quadro otimista sobre a aplicabilidade da técnica no diagnóstico da esporotricose felina, devendo ser avaliado sua sensibilidade e especicificidade em amostras de exsudato com o intuito de fornecer um diagnóstico precoce e ambulatorial desta enfermidade.