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COMPARAÇÃO DE DIFERENTES MÉTODOS FENOTÍPICOS DE DETECÇÃO DE CARBAPENEMASES FRENTE AOS MÉTODOS MOLECULARES

RESUMO

INTRODUÇÃO: Os carbapenêmicos são antibióticos beta-lactâmicos de espectro amplo, resistentes à maioria das beta-lactamases produzidas por microrganismos resistentes, sendo, por isso, frequentemente considerados como uma das últimas opções disponíveis para o combate a infecções bacterianas complicadas. No entanto, o surgimento de bactérias produtoras de enzimas que proporcionam resistência a carbapenêmicos (carbapenemases) tem provocado grande preocupação. Existem diversas maneiras de detectar as carbapenemases, desde métodos fenotípicos, até técnicas moleculares, como o RT-PCR, cada método com suas vantagens e desvantagens. Por conseguinte, há uma crescente demanda por estudos que comparem os diferentes métodos fenotípicos de detecção de carbapenemases com o RT-PCR, de modo a orientar condutas mais assertivas nos laboratórios científicos e propiciar a execução de testes com maior acurácia, rapidez e custo-benefício. – OBJETIVOS: Comparar alguns dos diferentes métodos fenotípicos atualmente disponíveis para detecção de carbapenemases em enterobactérias, tais como teste de Hodge modificado, inibição por ácido fenilborônico, teste imunocromatográfico e bloqueio enzimático por EDTA, ao método molecular, RT-PCR. – MATERIAIS E MÉTODO: Após treinamento e revisão de literatura, foram coletados dados de isolados testados fenotipicamente para a produção de carbapenemases em diferentes laboratórios do Paraná e encaminhados para o LACEN-PR para confirmação por método molecular (RT-PCR). Foram coletados no total os resultados de testes realizados em 224 amostras diferentes. Estes foram então analisados e compilados por método, tendo como padrão-ouro o RT-PCR. – RESULTADOS: Foram realizadas imunocromatografias em 87 dos 224 isolados incluídos no estudo; apenas 4 destes tiveram resultados não concordantes com aqueles do RT-PCR, sendo observados 2 resultados falso-positivos e 2 falso-negativos em relação ao RT-PCR. Em 179 dos isolados, foram feitos testes de Hodge modificados; dos resultados positivos, observou-se forte predominância de blaKPC no RT-PCR; dos resultados fracamente positivos ou inconclusivos, observou-se predominância de blaNDM no RT-PCR; dos resultados negativos, observou-se a predominância de nenhum gene de produção de carbapenemase no RT-PCR. Em 20 isolados, foi feito teste de detecção de carbapenemase por inibição por ácido fenilborônico; destes, 13 resultados foram positivos, e em todos esses o RT-PCR detectou apenas blaKPC; 7 isolados apresentaram resultado negativo, sendo que em 6 desses o RT-PCR detectou apenas o gene blaNDM e em 1 isolado o RT-PCR detectou blaKPC + blaNDM. Por fim, o teste de bloqueio enzimático por EDTA foi feito em 18 dos 224 isolados; destes, o teste foi positivo em 16, sendo que em 15 destes o RT-PCR detectou apenas bla NDM e em 1 isolado o RT-PCR não detectou gene de produção de carbapenemase; em 2 isolados o bloqueio enzimático por EDTA foi negativo, sendo que em 1 destes isolados o RT-PCR detectou apenas bla KPC e em 1 o RT-PCR não detectou gene de produção de carbapenemase. – CONSIDERAÇÕES FINAIS: Observou-se uma alta taxa de correspondência entre os testes fenotípicos e o RT-PCR, sugerindo que estes testes possuem alta confiabilidade para a detecção de carbapenemases. No entanto, mais estudos precisam ser feitos com amostras maiores para confirmar esta hipótese.

PALAVRAS-CHAVE:

carbapenemases; carbapenêmicos; testes fenotípicos.

APRESENTAÇÃO EM VÍDEO

Sessão E-Pôster:
(P4.1.8) Sessão Pôster: PIBIC – Ciências da Saúde (P.1) : 26/10 – 15h00 – 15h30 – Hall – Bloco Verde B01
Esta pesquisa foi desenvolvida com bolsa de Iniciação Científica no programa PIBIC da Fundação Araucária e da Superintendência Geral de Ciência, Tecnologia e Ensino Superior
Legendas:
  1. Estudante;
  2. Orientador;
  3. Colaboradores.

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